日前,植物保護學院王進軍教授團隊在細胞出版社(Cell Press)旗下子刊《生物技術趨勢》(Trends in Biotechnology)發表了題為《dsRNAEngineer:智能雙鏈RNA設計云平臺助力綠色植保》(dsRNAEngineer: a web-based tool of comprehensive dsRNA design for pest control)的研究論文。該研究開發了一款名為“dsRNAEngineer”的在線工具(訪問地址:https://dsrna-engineer.cn/),具備Screen-target(篩靶分析)、On-target(靶向分析)、Off-target(脫靶分析)和Multi-target(多靶點分析)四大功能,為RNA生物農藥的開發提供了高效、安全的解決方案。隨著RNA生物農藥的興起,該工具有望為RNAi生物技術在有害生物防治領域的應用提供有力支持,助力可持續農業的發展。

基于RNA干擾(RNAi)的害蟲控制技術通過靶向沉默有害生物的關鍵基因實現精準防控,其核心在于設計高效且安全的雙鏈RNA(dsRNA)分子。然而,當前的dsRNA設計主要集中在靶標基因的序列分析,缺乏全面的轉錄組水平評估,導致靶標篩選效率低且易產生脫靶效應。此外,現有的dsRNA設計工具多是基于模式生物的基因數據,而實際田間有害生物種類繁多,使得現有工具無法適用于非模式的有害生物,嚴重制約了RNA生物農藥的創制和應用。
研究團隊開發的dsRNAEngineer是一款基于云計算的RNA生物農藥精準設計在線平臺。該平臺通過優化dsRNA序列,確保其特異性靶向有害生物基因,同時避免對非靶標生物產生潛在風險。同時,平臺整合了943個物種的轉錄組數據,其中包括650種有害生物(昆蟲、螨類、線蟲、真菌等)和293種非靶標生物(水生生物、傳粉昆蟲、鳥類、農作物、家畜等)。這一豐富的數據資源使用戶能夠在大規模轉錄組水平上進行分析,確保設計的dsRNA在高效控制有害生物的同時,最大限度地減少對非靶標生物的潛在風險。

此外,dsRNAEngineer具備四大核心功能:一是Screen-target(篩靶分析),即通過轉錄組水平的序列比對(BLAST),篩選出在多個有害生物中高度保守的候選基因,為廣譜RNA農藥的設計提供理論基礎,助力用戶快速鎖定潛在的共靶標基因。二是On-target(靶向分析),即評估dsRNA對有害生物的沉默效果,利用滑動窗口分析推薦最優dsRNA片段,確保高效靶向有害生物基因。三是Off-target(脫靶分析),即分析dsRNA對非靶標生物(如益蟲、傳粉昆蟲等)的潛在影響,保障RNA農藥對非靶標生物的安全性。四是Multi-target(多靶點分析),即設計融合型dsRNA,靶向多個基因或有害生物,提升RNA農藥的廣譜性與防控效果。
利用dsRNAEngineer對兩種登記的RNAi控蟲靶標(MON87411和Ledprona)開展評估。結果表明,dsRNAEngineer可精準量化dsRNA對非靶標物種的潛在風險,驗證了該平臺在RNA農藥生態安全評估中的可靠性,為基于RNAi的綠色防控技術提供了標準化安全性評價工具。
植物保護學院王進軍教授和牛金志教授為論文通訊作者,碩士生陳洋為第一作者,John Vontas教授、Christos Andronis博士、博士生王自國、安欣、魏絲雨、碩士生史宇菲參與本研究工作。本研究得到了國家重點研發計劃青年科學家項目、國家自然科學基金重點國際(地區)合作研究項目等資助。
論文鏈接:https://doi.org/10.1016/j.tibtech.2025.01.002
平臺網站:https://dsrna-engineer.cn/
視頻介紹:https://dsrna-engineer.cn/tutorial